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pcr实验室为什么要进行三区隔离?常见的三区是指:
1、试剂配制区:pcr反应体系的配制区域。
2、标本处理区:包括扩增模板的制备,山西pcr实验室工程,即提取dna的地方。
3、pcr扩增和产物分析区:进行pcr扩增的区域,也是扩增产物进行凝胶电泳分析的区域。
如果将pcr扩增区域和产物分析区再次分开,就是四区隔离。四区隔离,主要目的是防止气溶胶在各个pcr区域之间的流动,好的方法是每个区域隔一幢楼,但操作起来不现实,于是便有了针对不同区域设置正负压的方法。
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pcr实验室各区域仪器设备配备通常如下:
(1)标准的pcr实验室试剂准备区: 仪器设备主要应有加样器、冰箱、天平、低速离心机、混匀器、可移动紫外灯等。可使用超净工作台作为试剂配制操作台面。
(2)标准的pcr实验室标本制备区仪器设备主要应有生物安全柜(尽量为b2, 可避免提取---在柜内反复循环,造成标本间交叉“污染”,出现假阳性结果。此外还应配备加样器、台式高速离心机(冷冻及常温)、台式低速离心机、恒温设备(水浴和/或干浴仪)、冰箱、混匀器和可移动紫外灯等。
(3)标准的pcr实验室扩增区主要仪器就是---扩增热循环仪(pcr仪,实时荧光或普通的)。热循环仪的电源应,并配备一个稳压电源或ups,以防止由于电压的波动对扩增测定的影响。此外,根据工作需要,还可配备加样器、超净台等。
(4)标准的pcr实验室产物分析区:本区所使用的仪器设备可能有加样器、电泳仪(槽)、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、dna测序仪、和等。在理想情况下,pcr实验室试剂准备、标本制备、扩增三个区域可设置缓冲间。在缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内
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pcr实验室布局:不同功能的工作区应是分隔独立的,各工作区有明显的标志,不能直通,如果紧密连接,需安装物品传递窗。试剂准备区和样品制备区为扩增前区; 扩增区和扩增产物分析区为为扩增后区,即从:试剂准备区——样品制备区——pcr扩增室——产物分析室,不得逆向流动。实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。各工作区的顶部应该安装紫外灯,紫外灯波长一般为254mm,配置要求为每20㎡一支40w的紫外灯。
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