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pcr实验室各区功能及主要设备:试剂准备区:主要进行试剂的制备,分装和主反应混合液的制备。试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。
样品制备区:主要进行样品的保存,---提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定dna的合成。 本区主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,压力一般设计为+10pa。
扩增区:主要进行dna扩增项目。已制备的dna模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:冰箱,加样器,离心机,扩增仪等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出,压力一般设计为-25pa。
扩增产物分析区:主要进行扩增产物的测定。本区主要设备有加样器,、和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域,压力一般设计为-25pa。
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pcr实验室为什么要进行三区隔离?
pcr实验总是出现假阳性,明明没有加模板,结果却扩出了产物。如果这种现象频频出现,就要注意一下操作环境。这里涉及气溶胶的概念,气溶胶是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系,能在空气中滞留至少几个小时。
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pcr实验室的设计规范
1、区域布局合理
pcr扩增试验室原则---为4个独立的工作区,即试剂准备区、样品处理区、---扩增区、产物分析区。为避免交叉污染,必须严格按照单一方向进入每个工作区,每个实验区之间的试剂和样品转移应通过转移窗口进行。
2、标准的三区分隔
pcr过程可分为试剂制备、标本制备和pcr扩增检测三个独立的实验区,整个实验区设置有一个整体缓冲走廊,每个独立的实验区都设有一个缓冲区。
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